spermiogramma dr. fulvio cesaroni. anamnesi personale e familiare anamnesi clinica del paziente:...
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SPERMIOGRAMMASPERMIOGRAMMA
Dr. Fulvio CesaroniDr. Fulvio Cesaroni
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Anamnesi personale e familiareAnamnesi personale e familiare
anamnesi clinica del paziente: malattie anamnesi clinica del paziente: malattie sessualmente trasmesse (MST), prostatiti, sessualmente trasmesse (MST), prostatiti, epididimiti, traumi scotali ed interventi incluso il epididimiti, traumi scotali ed interventi incluso il varicocele, vasectomie, erniorrafie inguinali, varicocele, vasectomie, erniorrafie inguinali, vasectomiavasectomia
Storia riproduttiva ed eventuali precedenti Storia riproduttiva ed eventuali precedenti paternità con la stessa o altra partnerpaternità con la stessa o altra partner
Interazioni sessuali della coppia: frequenza dei Interazioni sessuali della coppia: frequenza dei rapporti sessualirapporti sessuali
Assunzione di farmaci, droghe, tossine da Assunzione di farmaci, droghe, tossine da lavorazionelavorazione
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Indagine preliminare Indagine preliminare epidemiologicaepidemiologica
Malattie sessualmente trasmesse:Malattie sessualmente trasmesse: HIVHIV LueLue GonorreaGonorrea TrichomonasTrichomonas MycoplasmaMycoplasma Chlamydia TracomatisChlamydia Tracomatis Herpes virus I e IIHerpes virus I e II HPVHPV
Esami non anteriori a 30 giorni
•HCV e HBVHCV e HBV
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RACCOLTA DEL LIQUIDO SEMINALE: RACCOLTA DEL LIQUIDO SEMINALE: modalitàmodalità
Fornire istruzioni scritte per la raccoltaFornire istruzioni scritte per la raccolta Astinenza di 2-6 gAstinenza di 2-6 g Eventuale seconda raccolta per evitare la tensione della Eventuale seconda raccolta per evitare la tensione della
raccolta e per determinare l’esatto periodo di astinenza per raccolta e per determinare l’esatto periodo di astinenza per quel determinato pazientequel determinato paziente
La masturbazione è consigliataLa masturbazione è consigliata In casi particolari è consigliato l’uso di condom non medicatiIn casi particolari è consigliato l’uso di condom non medicati Coito interrotto: sconsigliatoCoito interrotto: sconsigliato
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• accurata igiene dei genitali e delle maniaccurata igiene dei genitali e delle mani• astinenza 3-5 ggastinenza 3-5 gg• raccolta in laboratorio (preferibile)raccolta in laboratorio (preferibile)• raccolta domiciliare raccolta domiciliare (esibire entro 60’ evitando (esibire entro 60’ evitando shock termici)shock termici) • contenitore sterile non tossicocontenitore sterile non tossico• rintracciabilità del campione: uso di una rintracciabilità del campione: uso di una etichettaetichetta• accertamento dell’identità personaleaccertamento dell’identità personale• data, ora e luogo di raccoltadata, ora e luogo di raccolta
Modalità di raccolta del liquido seminaleModalità di raccolta del liquido seminale
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Cura del campioneCura del campione
Conservazione e valutazione a temperatura Conservazione e valutazione a temperatura ambiente (20-25°C)ambiente (20-25°C)
Non porre il contenitore in termostato prima della Non porre il contenitore in termostato prima della valutazione valutazione (>25°C attiva i movimenti riducendo la (>25°C attiva i movimenti riducendo la durata) durata)
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Valutazione al m.o. a contrasto di faseValutazione al m.o. a contrasto di fase
Prima valutazione rapida su vetrino Prima valutazione rapida su vetrino Determinazione precisa con camera Determinazione precisa con camera
di Makler (non c’è bisogno di diluire)di Makler (non c’è bisogno di diluire) Camera di NeubauerCamera di Neubauer KovaKova
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Camera di NeubauerCamera di Neubauer
Per il conteggio più preciso degli spz. Per il conteggio più preciso degli spz. in caso di criptozoospermiain caso di criptozoospermia
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centrifugacentrifuga
A braccio fisso: per le procedure di A braccio fisso: per le procedure di lavaggio degli spermatozoi.lavaggio degli spermatozoi.
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Valori normali del liquido Valori normali del liquido seminale secondo W.H.Oseminale secondo W.H.O
Liquefazione: completa in 60’ a temperatura ambienteLiquefazione: completa in 60’ a temperatura ambiente Aspetto: omogeneo, grigio opalescenteAspetto: omogeneo, grigio opalescente Viscosità: assente dopo liquefazioneViscosità: assente dopo liquefazione Volume ≥ 2 ml Volume ≥ 2 ml pH ≥ 7,2pH ≥ 7,2 Concentrazione nemaspermica ≥20 milioni /ml Concentrazione nemaspermica ≥20 milioni /ml N° totale spz/eiaculato ≥ 40 milioni/eiaculatoN° totale spz/eiaculato ≥ 40 milioni/eiaculato Motilità alla 1h:Motilità alla 1h:
≥ ≥50% con progressione lineare o 50% con progressione lineare o ≥ ≥ 25% con progressione rapida rettilinea25% con progressione rapida rettilinea
Morfologia ≥ 30% forme normli (≥14% sec Kruger)Morfologia ≥ 30% forme normli (≥14% sec Kruger) Vitalità ≥ 50% Vitalità ≥ 50% Leucociti < 1 milione /mlLeucociti < 1 milione /ml MAR test < 10% di spz con particelle aderentiMAR test < 10% di spz con particelle aderenti
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VolumeVolume
valori normali: 1,5 - 5 ml valori normali: 1,5 - 5 ml < 0,5 ml ipospermia (ridotta funzione < 0,5 ml ipospermia (ridotta funzione
secretoria delle ghiandole accessorie secretoria delle ghiandole accessorie su base flogistica)su base flogistica)
> 6 ml: iperspermia o poliposia.> 6 ml: iperspermia o poliposia. Aspermia: assenza di liquido Aspermia: assenza di liquido
seminaleseminale
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pHpH
Valori normali: 7,2 - 8,4 Valori normali: 7,2 - 8,4 < 7: ostruzione dei dotti eiaculatori < 7: ostruzione dei dotti eiaculatori
con prevalenza del solo secreto con prevalenza del solo secreto prostatico (fosfatasi acida)prostatico (fosfatasi acida)
> 8,5: flogosi delle ghiandole > 8,5: flogosi delle ghiandole accessorieaccessorie
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Colore Colore
Il liquido seminale è Il liquido seminale è normalmente translucente o normalmente translucente o grigiastro. La presenza di grigiastro. La presenza di sangue nel seme sangue nel seme (ematospermia) può dare al (ematospermia) può dare al seme un colore rosso scuro. seme un colore rosso scuro. La presenza di sangue nel La presenza di sangue nel seme è un’anomalia che dovrà seme è un’anomalia che dovrà sempre essere evidenziata sempre essere evidenziata nella relazione. nella relazione.
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Conta nemaspermicaConta nemaspermica
Valori normali: 20-200 milioni/mlValori normali: 20-200 milioni/ml < 20 milioni/ml: oligozoospermia lieve < 20 milioni/ml: oligozoospermia lieve
/media/media < 5 milioni/ml oligozoospermia severa< 5 milioni/ml oligozoospermia severa < 1 milione/ml criptozoospermia< 1 milione/ml criptozoospermia 0 spz.: azoospermia0 spz.: azoospermia > 350 milioni/ml polizoospermia> 350 milioni/ml polizoospermia
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Numero normale e potere fecondanteNumero normale e potere fecondante
Anche < 20 milioni/ml: fecondanteAnche < 20 milioni/ml: fecondante Concetto di total motily count (TMC)Concetto di total motily count (TMC)
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Valutazione del numero con sistemi Valutazione del numero con sistemi automatizzati e computerizzatiautomatizzati e computerizzati
Analizzatori seminali automatici: CASA Analizzatori seminali automatici: CASA (computer-aieded sperm analysis)(computer-aieded sperm analysis)
Analizzatori che utilizzano la stroboscopia Analizzatori che utilizzano la stroboscopia applicata alla fotografia o MEP-Metod applicata alla fotografia o MEP-Metod (multi exposure photography)(multi exposure photography)
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MotilitàMotilità
differenza tra motilità e vitalitàdifferenza tra motilità e vitalità v.n. > 50% di elementi mobili a 2 hv.n. > 50% di elementi mobili a 2 h Valori < 40% : ipocinesia (lieve, media Valori < 40% : ipocinesia (lieve, media
severa)severa) v.n. alla 24h > 20-30%v.n. alla 24h > 20-30% motilità normale: progressiva e rettilineamotilità normale: progressiva e rettilinea Motilità discinetica o agitatoria in loco: se Motilità discinetica o agitatoria in loco: se
non progressiva rettilineanon progressiva rettilinea acinesia: assenza di movimentiacinesia: assenza di movimenti
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motilità e mobilità motilità e mobilità
Valutazione oggettiva: Valutazione oggettiva: Metodiche fotografiche: scie degli spz.Metodiche fotografiche: scie degli spz. Videoregistrazione della cinetica spermatica con Videoregistrazione della cinetica spermatica con
sistema CASA: valutazione della % di motilità e sistema CASA: valutazione della % di motilità e velocità media computerizzatavelocità media computerizzata
Metodiche spettrofotometricheMetodiche spettrofotometriche Laser light scatteringLaser light scattering
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motilità e mobilitàmotilità e mobilità
Valutazione soggettiva della % di motilità e del tipo Valutazione soggettiva della % di motilità e del tipo di movimento al m.o. a contrasto di fase:di movimento al m.o. a contrasto di fase: Su vetrino oppure in camera di MaklerSu vetrino oppure in camera di Makler Valori normali: motilità rettilinea progressiva (> 25u/sec) Valori normali: motilità rettilinea progressiva (> 25u/sec)
presente in ≥40% degli spz presente in ≥40% degli spz Osservare 5 – 10 hpfOsservare 5 – 10 hpf
Definizione dei tipi di motilità:Definizione dei tipi di motilità: Tipo a : spz. rapidi progressivi retilineiTipo a : spz. rapidi progressivi retilinei Tipo b : spz. lenti progressivi rettilineiTipo b : spz. lenti progressivi rettilinei Tipo c : spz. con movimento in situTipo c : spz. con movimento in situ Tipo d: spz. immobiliTipo d: spz. immobili
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dizionario seminologicodizionario seminologico PolizoospermiaPolizoospermia
Numero di spermatozoi >350 milioni/mlNumero di spermatozoi >350 milioni/ml OligozoospermiaOligozoospermia
Numero di spz totale <20 milioni/ml Numero di spz totale <20 milioni/ml IpospermiaIpospermia
volume < 1.5 ml volume < 1.5 ml IperspermiaIperspermia
volume >5.5 ml volume >5.5 ml AspermiaAspermia
Assenza di liquido seminale Assenza di liquido seminale PiospermiaPiospermia
Leucociti >2 milioni/ml Leucociti >2 milioni/ml EmatospermiaEmatospermia
Prenza di globuli rossi nel seme Prenza di globuli rossi nel seme AstenozoospermiaAstenozoospermia
Motilità degli spz. < 40% Motilità degli spz. < 40% TeratozoospermiaTeratozoospermia
> 40% del seme presenta forme anomali > 40% del seme presenta forme anomali NecrozoospermiaNecrozoospermia
Elevata percentuale di spz. mortiElevata percentuale di spz. morti OligoastenozoospermiaOligoastenozoospermia
spz. mobili <8 million/ml spz. mobili <8 million/ml
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Definizione di normale Definizione di normale “motilità“ “motilità“
La motilità spermatica è molto variabile in La motilità spermatica è molto variabile in ragione del tempo trascorso dalla raccolta, ragione del tempo trascorso dalla raccolta, della temperatura e delle manipolazioni della temperatura e delle manipolazioni tecniche.tecniche.
Gli spz. non sopravvivono bene per molto Gli spz. non sopravvivono bene per molto tempo nel liquido seminale tempo nel liquido seminale
In natura gli spz. lasciano rapidamente il In natura gli spz. lasciano rapidamente il liquido seminale per entrare nel muco liquido seminale per entrare nel muco cervicale.cervicale.
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astenozoospermiaastenozoospermia
Etiologia: anomala spermatogenesi Problemi di maturazione epididimale Patologie del trasporto varicocele.
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Necrozoospermia work-up
Occorre innanzitutto sottoporre Occorre innanzitutto sottoporre questi spz con motilità assente a test questi spz con motilità assente a test dinamici per valutarne la vitalitàdinamici per valutarne la vitalità
In caso positivo, gli spz, immobili ma In caso positivo, gli spz, immobili ma vitali, possono essere utilizzati per vitali, possono essere utilizzati per ICSI con buone percentuali di ICSI con buone percentuali di successo.successo.
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morfologiamorfologia
Spermatozoo normale Spermatozoo normale (WHO 3° edizione) (WHO 3° edizione) : :
testa ovale testa ovale (3-5 um x 2-3um)(3-5 um x 2-3um)
area acrosomiale area acrosomiale (= 30% della (= 30% della testa)testa)
pezzo intermedio pezzo intermedio (7-8 um x 1 um)(7-8 um x 1 um)
coda coda (4 – 5 um)(4 – 5 um)
caratteristica individuale, non cambia nel tempocaratteristica individuale, non cambia nel tempo
acrosomaacrosoma
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Alterazioni morfologicheAlterazioni morfologiche
metodi di osservazione : metodi di osservazione : • striscio e colorazione sec. May Grumwald-striscio e colorazione sec. May Grumwald-Giemsa, WrightGiemsa, Wright
• ematossilina eosina se spz > 10 milioniematossilina eosina se spz > 10 milioni
• striscio da centrifugato se spz < 10 milioni striscio da centrifugato se spz < 10 milioni
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Anomalie della testaAnomalie della testa A) spz a testa larga ed ovale (A) spz a testa larga ed ovale (macrocefalomacrocefalo) con tratto ) con tratto
intermedio e coda normaliintermedio e coda normali B) spz a testa piccola (B) spz a testa piccola (microcefalimicrocefali)) C) spz a testa allungata (C) spz a testa allungata (taperingtapering) ) C) senza acrosoma (C) senza acrosoma (globozoospermaglobozoosperma)) E) spz. E) spz. con testa piriforme con testa piriforme che termina nel tratto che termina nel tratto
intermedio intermedio F) spz. F) spz. con doppia testa con doppia testa o più teste ma con una sola coda e o più teste ma con una sola coda e
tratto intermedio normaletratto intermedio normale Forme amorfe: Forme amorfe: teste iperpigmentate senza acrosoma teste iperpigmentate senza acrosoma con con
tratto intermedio e coda normalitratto intermedio e coda normali
Classificazione sec. Kruger:Classificazione sec. Kruger:a) debolmente amorfe, con diametro inferiore alla norma ma con a) debolmente amorfe, con diametro inferiore alla norma ma con acrosoma normaleacrosoma normaleb) marcatamente amorfe: se manca l’acrosoma o se questo è <30% o b) marcatamente amorfe: se manca l’acrosoma o se questo è <30% o >70% della testa>70% della testa
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globozoospermiaglobozoospermia
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anomalie del pezzo intermedioanomalie del pezzo intermedio
presenza di un’appendice presenza di un’appendice citoplasmatica che normalmente si citoplasmatica che normalmente si osserva ma che è >50% della osserva ma che è >50% della grandezza della testa. Può essere grandezza della testa. Può essere unita alla testa al pezzo intermedio o unita alla testa al pezzo intermedio o alla coda.alla coda.
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Anomalie della codaAnomalie della coda
a)a) coda duplice coda duplice
b)b) coda angolata coda angolata
c)c) coda corta coda corta
d)d) coda arrotolata coda arrotolata
e)e) coda assente coda assente
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altri elementi figurati dell’eiaculatoaltri elementi figurati dell’eiaculato
spermatogoni: (tipo A o indifferenziati e/o tipo B o spermatogoni: (tipo A o indifferenziati e/o tipo B o differenziati) Presentano un caratteristico alone differenziati) Presentano un caratteristico alone perinucleare. perinucleare. ØØ nucleare 6-7 u nucleare 6-7 u
spermatociti primari (spermatociti primari (ØØ nucleo 8-9u) nucleo 8-9u) cellule rotonde , cellule rotonde , ØØ 17-19u, nucleo abbastanza 17-19u, nucleo abbastanza
grosso: 8-18u frequentemente rotondo con grosso: 8-18u frequentemente rotondo con cromatina a forma di gomitolo, che occupa cromatina a forma di gomitolo, che occupa talvolta l’intera cellulatalvolta l’intera cellula
spermatociti secondari ( spermatociti secondari ( Ø Ø nucleare 6-7 u) hanno nucleare 6-7 u) hanno aspetto simile alle cellule rotonde, con nucleo aspetto simile alle cellule rotonde, con nucleo rotondo la cui grandezza varia tra i 6 -8urotondo la cui grandezza varia tra i 6 -8u
spermatidi rotondi: spermatidi rotondi: ØØ 9,5 – 12 u, citoplasma 9,5 – 12 u, citoplasma omogeneo eosinofilo, nucleo omogeneo, omogeneo eosinofilo, nucleo omogeneo, ØØ l.6-7u l.6-7u
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spermatidispermatidi
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cellule rotondecellule rotonde
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altri elementi figurati altri elementi figurati dell’eiaculatodell’eiaculato
cellule germinali in caso di azoospermia:cellule germinali in caso di azoospermia:
presenti: blocco maturativo parziale presenti: blocco maturativo parziale dell’epitelio germinativo testicolaredell’epitelio germinativo testicolare
assenti: ostruzione bilaterale delle vie assenti: ostruzione bilaterale delle vie seminali seminali
cellule epiteliali metaplastiche:cellule epiteliali metaplastiche: presenti nelle flogosi croniche delle vie presenti nelle flogosi croniche delle vie
uro-genitaliuro-genitali
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leucocitileucociti
> 1 milione/ml: flogosi moderata> 1 milione/ml: flogosi moderata > 2 milioni/ml: leucospermia> 2 milioni/ml: leucospermia
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altri elementi figuratialtri elementi figurati
MacrofagiMacrofagi Cellule cilindriche ed altre cellule Cellule cilindriche ed altre cellule
epitelialiepiteliali EmazieEmazie BatteriBatteri Cristalli di sperminaCristalli di spermina Corpuscoli prostaticiCorpuscoli prostatici
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Studio immunologicoStudio immunologico
Anticorpi antisperma (ASA)Anticorpi antisperma (ASA)
Gli ASA si dividono in due classi: IgA and Ig G.Gli ASA si dividono in due classi: IgA and Ig G. Gli anticorpi Ig A sono fonte dei maggiori Gli anticorpi Ig A sono fonte dei maggiori
problemi per lo sperma rispetto alle IG G.problemi per lo sperma rispetto alle IG G.
Gli anticorpi della classe Ig M a causa della loro Gli anticorpi della classe Ig M a causa della loro relativamente maggiore grandezza molecolare relativamente maggiore grandezza molecolare sono raramente presenti nel seme. sono raramente presenti nel seme.
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biochimica
Fruttosio (vescicole seminali) \ (v.n. 200-600 mg/dl)Fosfatasi acida (prostata) \ (v.n. 78-600 UI/lt)Acido citrico (prostata) \ (v.n. 200-900 mg/dl)Carnitina (epididimo) \ (0.2-0.4 µmol/ml)Zinco (diminuisce nelle epididimiti) \ (2-40 mg/dl)